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Dec 05, 2023

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Informes científicos volumen 12,

Scientific Reports volumen 12, Número de artículo: 22287 (2022) Citar este artículo

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La relaxina-2 ejerce muchos efectos cardiovasculares favorables en circunstancias patológicas como la fibrilación auricular (FA) y la insuficiencia cardíaca, pero los mecanismos subyacentes a sus acciones no se conocen por completo. Dado que la inflamación y la fibrosis son procesos fundamentales en la patogénesis de la FA, nuestro objetivo fue estudiar la relación entre los niveles plasmáticos de relaxina-2 en la aurícula izquierda (AI) y la vena periférica con moléculas implicadas en la fibrosis, la inflamación y el estrés oxidativo en pacientes con FA, y para evaluar la capacidad antifibrótica de la relaxina-2 en fibroblastos cardíacos auriculares humanos normales (NHCF-A). Los niveles plasmáticos de relaxina-2 en venas periféricas fueron más altos que los niveles plasmáticos de relaxina-2 LA en hombres, mientras que, en mujeres, los niveles de relaxina-2 en venas periféricas aumentaron en comparación con los hombres. Los pacientes con FA con niveles más altos de relaxina-2 exhibieron una reducción en los niveles plasmáticos de H2O2 y en los niveles de ARNm de alfa-defensina 3 (DEFA3) e IL-6 en los leucocitos del plasma LA. El tratamiento in vitro con relaxina-2 inhibió la migración de NHCF-A y disminuyó los niveles de ARNm y proteína de la molécula profibrótica que transforma el factor de crecimiento β1 (TGF-β1). Nuestros resultados respaldan una asociación entre la relaxina-2 y las moléculas involucradas en la fibrosis, la inflamación y el estrés oxidativo en pacientes con FA, y refuerzan el papel protector antifibrótico de esta hormona en NHCF-A; reforzando la relevancia de la relaxina-2 en la fisiopatología, diagnóstico y tratamiento de la FA.

Actualmente, se considera que la hormona pleiotrópica relaxina-2 podría ser beneficiosa para el manejo de la fibrilación auricular (FA) debido a (a) sus notables propiedades antiarrítmicas y cardioprotectoras, como sus propiedades antiinflamatorias, antiapoptóticas, antifibróticas, antihipertróficas y antioxidantes (b) su capacidad para inhibir la angiotensina II (Ang II), o (c) su papel en la regulación del recambio de la matriz extracelular (MEC) y la reducción del depósito excesivo de colágeno en los tejidos cardíacos1,2,3,4,5. La relaxina-2 parece desempeñar una función antifibrótica relevante a través de la regulación de la proliferación de fibroblastos cardíacos, la modulación de la diferenciación de miofibroblastos y la síntesis de colágeno, y también posiblemente a través del control de la expresión de factores profibróticos (incluido el factor de crecimiento transformante-β1 (TGF-β1 ) o Ang II) y metaloproteinasas de matriz (MMP)1,2,6. Algunos modelos preclínicos han demostrado que esta hormona reduce la susceptibilidad a la FA después de un infarto de miocardio3 y en ratas hipertensas ancianas4,5. Uno de los mecanismos sugeridos para estar involucrado en este efecto podría ser la regulación de las corrientes iónicas y el inotropismo en las células cardíacas4,7.

Los pacientes con FA persistente o recidiva tras la ablación con catéter por radiofrecuencia muestran un aumento de los niveles plasmáticos de relaxina-2, que, en algunos casos, se correlaciona positivamente con el factor de necrosis tumoral-α (TNF-α), TGF-β, procolágeno tipo I C-terminal péptido (PICP) y diámetro de la aurícula izquierda (LA)8,9. La implicación de estas moléculas en la fibrosis sugiere una estrecha relación entre la relaxina-2, la fibrosis y la FA8,9. El hecho de que la forma recombinante de la relaxina-2, conocida como serelaxina, haya demostrado ser segura en pacientes con insuficiencia cardiaca aguda (ICA) en el ensayo clínico de fase III RELAXin in Acute Heart Failure (RELAX-AHF) constituye una ventaja adicional y anima el posible uso de esta hormona como estrategia terapéutica para la FA10,11, ya que el 53% de los participantes tenía antecedentes clínicos de FA, el 41% presentó FA durante el transcurso del ensayo clínico y el tratamiento con serelaxina se asoció con una leve disminución en la incidencia de FA10,11,12. Lamentablemente, en la actualidad no existen ensayos clínicos específicos que estudien el efecto del tratamiento con esta hormona en el contexto de la FA. El destacado papel biológico de la relaxina-2, junto con los numerosos hallazgos básicos, clínicos y traslacionales que muestran sus beneficiosas propiedades cardiovasculares y electrofisiológicas, sustentan que es posible considerar que esta hormona podría ser útil como biomarcador en el diagnóstico, predicción, estratificación de riesgo y gestión de AF5,8,9,13. En este estudio, nuestro propósito fue caracterizar los niveles plasmáticos endógenos de relaxina-2 en pacientes con FA, así como su posible asociación con moléculas implicadas en mecanismos de estrés fibrótico, inflamatorio y oxidativo, todos ellos íntimamente relacionados con la fisiopatología de la FA14 .

Determinamos los niveles plasmáticos de relaxina-2 en LA y venas periféricas en 68 pacientes consecutivos (59 hombres y 9 mujeres) con FA. Los hombres alcanzaron una concentración de relaxina-2 (expresada en mediana ± IQR) de 20,19 ± 44,59 pg/mL y 35,03 ± 53,79 pg/mL en AI y vena periférica, respectivamente. Las mujeres mostraron una concentración de relaxina-2 de 21,43 ± 59,89 pg/mL en AI y de 92,24 ± 141,98 pg/mL en vena periférica. Toda la población mostró diferencias sustanciales en los niveles plasmáticos de relaxina-2 en venas periféricas en función del sexo. Se encontraron niveles similares entre hombres y mujeres con respecto a los niveles de LA relaxina-2. Sin embargo, los niveles de relaxina-2 en la vena periférica en las mujeres fueron más altos que en los hombres (valor de p = 0,014) (Fig. 1). Entre los hombres, los niveles plasmáticos de relaxina-2 en la vena periférica aumentaron significativamente en comparación con los niveles plasmáticos de relaxina-2 en LA (valor p = 0,022) (Fig. 1). En nuestro estudio, de un total de 68 pacientes, 4 pacientes (5,90% de los pacientes) tenían niveles indetectables de relaxina-2 en AI, y solo 2 pacientes (2,90% de los pacientes) tenían niveles indetectables de relaxina-2 en periféricos. vena.

Gráfico de dispersión que muestra los valores individuales de los niveles plasmáticos de relaxina-2 en la aurícula izquierda y la vena periférica de pacientes con fibrilación auricular (FA) según el sexo y el panel con las concentraciones plasmáticas de relaxina-2 determinadas. El paréntesis con el símbolo '*' indica que los niveles plasmáticos de relaxina-2 en la vena periférica son significativamente más altos que los niveles plasmáticos de relaxina-2 en la aurícula izquierda en los hombres. El símbolo '*' indica que los niveles plasmáticos de relaxina-2 en la vena periférica de las mujeres son significativamente más altos que los niveles plasmáticos de relaxina-2 en la vena periférica de los hombres. La barra horizontal representa el valor medio de los niveles plasmáticos de relaxina-2 en la aurícula izquierda y la vena periférica de hombres y mujeres. Las concentraciones plasmáticas de relaxina-2 en la aurícula izquierda y la vena periférica de pacientes con FA según el sexo en el panel derecho se expresan como mediana ± rango intercuartílico (RIC). nhombres = 59, nmujeres = 9. Análisis estadístico: prueba U de Mann-Whitney. *valor p < 0,05.

Se utilizó un valor de corte de relaxina-2, definido por el valor mediano de los niveles plasmáticos de relaxina-2 en AI y vena periférica, para agrupar a los pacientes con niveles altos o bajos de relaxina-2 en plasma de AI y vena periférica. No encontramos diferencias estadísticas en cuanto a sexo, edad, IMC, HTA, diabetes mellitus tipo 2 (DM2) o enfermedad renal crónica (ERC). Tampoco la glucosa, colesterol total (CT), colesterol de lipoproteínas de baja densidad (LDL-c), colesterol de lipoproteínas de alta densidad (HDL-c), triglicéridos (TG), fracción de eyección del ventrículo izquierdo (FEVI), frecuencia cardíaca (FC) , el área LA o el tipo de FA fueron estadísticamente diferentes entre los subgrupos. El número de fumadores fue significativamente mayor en el subgrupo de pacientes con niveles plasmáticos de LA relaxina-2 por encima del valor medio (valor p = 0,043). Las características generales de los pacientes al ingreso entre subgrupos se muestran en la tabla 1. Además, no se observaron diferencias estadísticas cuando se separó la población inicial por sexo (tablas 2 y 3).

Los pacientes con concentraciones de relaxina-2 en la vena periférica por encima de la mediana tenían niveles significativamente más altos de Gal-3 en el plasma de la vena periférica (valor de p = 0,022) que los pacientes con concentraciones de relaxina-2 por debajo de la mediana (Tabla 4). Por el contrario, los niveles de expresión de ARNm de DEFA3 e IL-6 en leucocitos del plasma LA fueron significativamente más bajos en pacientes con niveles más altos de relaxina-2 en LA (valor p = 0,034 para DEFA3 y valor p = 0,003 para IL-6) y en vena periférica (valor de p = 0,001 para DEFA3 y valor de p = 0,001 para IL-6) (tabla 4). Además, los niveles plasmáticos de H2O2 en venas periféricas tendieron a disminuir (valor p = 0,065) en pacientes con niveles plasmáticos elevados de relaxina-2 en venas periféricas (Tabla 4).

Entre los hombres (n = 59), los niveles plasmáticos de Gal-3 en LA (valor de p = 0,041) y vena periférica (valor de p = 0,009) fueron significativamente más altos en pacientes con FA con niveles plasmáticos de relaxina-2 en vena periférica por encima de la mediana ( Tabla 5). Sin embargo, la asociación entre Gal-3 y relaxina-2 se perdió después de incluir los factores de confusión (edad, IMC y AHT) en un análisis de regresión logística (Tablas complementarias S1 y Tabla S2 en línea). Los pacientes varones con niveles plasmáticos de relaxina-2 en LA y venas periféricas por encima de la mediana mostraron una disminución significativa de DEFA3 (valor de p = 0,019 en LA y valor de p = 0,004 en vena periférica) e IL-6 (valor de p = 0,002). en LA, y valor de p = 0,000 en vena periférica) niveles de expresión de ARNm en leucocitos del plasma de LA (Tabla 5). Además, los hombres con niveles plasmáticos altos de relaxina-2 en las venas periféricas mostraron una disminución significativa (valor de p = 0,002) en los niveles plasmáticos de H2O2 en las venas periféricas (Tabla 5). El análisis de regresión logística ha mostrado una asociación significativa entre estos biomarcadores y la relaxina-2 (considerando también la edad, el IMC y la HTA como covariables) (Tablas complementarias S3, S4, S5, S6 y S7 en línea).

En mujeres (n = 9), no pudimos detectar diferencias significativas (probablemente por la pequeña n) en los niveles plasmáticos de Gal-3 y H2O2, ni en la expresión de ARNm de DEFA3 e IL-6 en leucocitos de sangre LA entre los subgrupos creados según el valor medio de la distribución de relaxina-2 en LA y vena periférica (Tabla 6).

Además, los niveles plasmáticos de relaxina-2 de LA y/o vena periférica han mostrado correlaciones significativas con Gal-3, DEFA3, IL-6 o H2O2 en toda la población de pacientes con FA sujetos al estudio (Tabla complementaria S8 en línea). Además, hemos encontrado un aumento significativo en los niveles plasmáticos de relaxina-2 en LA (valor de p = 0,001) y vena periférica (valor de p = 0,017) de pacientes con FA con ritmo sinusal en comparación con el ritmo de FA (Fig. S1 complementaria en línea); junto con una correlación significativa entre los niveles plasmáticos de relaxina-2 cardíaca y/o periférica con Gal-3, DEFA3 e IL-6 en pacientes con fibrilación auricular con ritmo sinusal, mientras que estas correlaciones estuvieron ausentes en pacientes con fibrilación auricular con ritmo de fibrilación auricular (Tabla complementaria S9 en línea) . También hemos observado un aumento significativo en la expresión de ARNm de IL-6 en leucocitos de sangre LA (valor de p = 0,001) y en los niveles plasmáticos de H2O2 LA (valor de p = 0,019) en pacientes con FA con ritmo de FA (Fig. S1 complementaria en línea ).

En ausencia de FBS, el tratamiento con RLX2 mostró una tendencia a reducir la migración de NHCF-A al área de la herida. A 1 ng/mL, afectó significativamente al porcentaje de cicatrización de la herida con un pico de significación a las 8 h de realizada la herida (4,66 ± 0,74 % en control vs. 2,91 ± 1,03 % en RLX2 a 1 ng/mL, p- valor = 0.008, n = 6 réplicas biológicas × 4 réplicas técnicas) (Fig. 2a, b).

Efecto de la relaxina-2 en la capacidad de migración de fibroblastos cardíacos auriculares humanos normales (NHCF-A) y en la expresión de marcadores profibróticos en NHCF-A. (a) Microscopía óptica LasX DMI6000B Objetivo: 4X; (b) curso temporal del ensayo de migración durante 4, 8, 12, 16, 20 y 24 h (n = 6 réplicas biológicas × 4 réplicas técnicas). ( c ) expresión de ARNm de genes seleccionados después de un tratamiento de 24 h con RLX2 a 1 ng / ml (n = 3 réplicas biológicas × 2 réplicas técnicas). ( d ) Niveles de expresión de la proteína TGF-β1 en NHCF-A después del tratamiento con RLX2 durante 24 h (n = 6 réplicas biológicas). Los datos se expresan como media ± DE para (b, c) y como mediana ± rango intercuartílico (RIC) para (d). El cambio entre los tratamientos se analizó mediante la prueba t pareada (b, c) o la prueba de rango con signo de Wilcoxon (d). *valor p < 0,05. Las manchas originales sin recortar se presentan en las Figuras complementarias S2 y S3 en el archivo de Información complementaria. αSMA: alfa actina de músculo liso; COL1A2: cadena alfa 2 de colágeno tipo I; DDR2: receptor de dominio de discoidina tirosina quinasa 2; GAPDH: gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa; PDGFRα: receptor alfa del factor de crecimiento derivado de plaquetas; POSTN: periostina; TGF-β1: factor de crecimiento transformante β1; VIM: vimentina.

El tratamiento con RLX2 a 1 ng/mL durante 24 h no cambió los niveles de expresión de ARNm de COL1A2, DDR2 y PDGFRα en células NHCF-A. Por el contrario, RLX2 tendió a reducir los niveles de expresión de ARNm de αSMA, TGF-β1, POSTN y VIM, alcanzando la significación estadística en TGF-β1 (1,72 ± 0,07 unidades arbitrarias (au) en el control frente a 1,70 ± 0,07 au en RLX2, valor de p = 0.038, n = 3 réplicas biológicas × 2 réplicas técnicas) en células NHCF-A (Fig. 2c).

Encontramos que el tratamiento con 1 ng/mL de RLX2 durante 24 h disminuyó significativamente los niveles de proteína de TGF-β1 (valor p = 0.031, n = 6 réplicas biológicas) en células NHCF-A (Fig. 2d).

Durante los últimos veinte años se han realizado un gran número de ensayos clínicos con el fin de evaluar el efecto de la relaxina-2 en diferentes circunstancias fisiológicas y patológicas15,16. Al mismo tiempo, aunque numerosos trabajos han analizado los niveles plasmáticos de relaxina-2 en pacientes con enfermedades cardiovasculares establecidas (incluida la FA), no se analizó la posible relación entre los niveles circulantes de relaxina-2 y diferentes marcadores de riesgo y/o pronóstico relacionados. al estado metabólico y composición corporal8,9,17,18. El prometedor uso de la relaxina-2 como biomarcador, predictor de riesgo o agente terapéutico en la enfermedad cardiovascular se basa en su probada capacidad como supresor de la inflamación y la fibrosis, dos mecanismos fisiopatológicos de gran relevancia en la FA y la insuficiencia cardíaca (IC)19,20. .

En el presente estudio, hemos analizado por primera vez las concentraciones de relaxina-2 en plasma de AL, y hemos comparado los niveles plasmáticos de relaxina-2 en la circulación periférica y cardíaca. Nuestra población con FA mostró niveles plasmáticos de relaxina-2 en venas periféricas más bajos que los determinados previamente en plasma o suero de mujeres embarazadas21, pero más altos que los niveles circulatorios de relaxina-2 en hombres y mujeres menopáusicas18,22, y similares a estudios previos con pacientes con FA8,9 . Parecidos a los resultados reportados por otros autores en estudios con pacientes con IC17,18, nuestros hallazgos mostraron una concentración alta y variable de relaxina-2 en plasma de pacientes con FA, con solo un 5,90% y 2,90% de pacientes con niveles de relaxina-2 por debajo del límite de detección en LA y vena periférica, respectivamente. En los hombres, podríamos plantear la hipótesis de que el aumento de los niveles plasmáticos de relaxina-2 periférica en comparación con los detectados en las aurículas puede explicarse por las siguientes razones: (1) la secreción de relaxina-2 de los tejidos periféricos (aurículas, ventrículos, riñón, pulmón). , hígado, bazo, páncreas, piel, tejidos vasculares), donde está altamente expresado23 y/o (2) el hecho de que la relaxina-2 produce sus efectos en el corazón al actuar directamente sobre el receptor 1 del péptido de la familia de la relaxina (RXFP1), localizado principalmente en las aurículas23,24; por lo que la relaxina-2 disponible para la detección por ELISA en muestras de sangre auricular podría disminuir por la alta unión de la molécula a la RXFP1 altamente expresada a este nivel. Además, nuestro estudio ha encontrado por primera vez una diferencia estadística en los niveles plasmáticos periféricos de relaxina-2 relacionada con el género. Las mujeres con FA mostraron una mayor concentración de relaxina-2 en plasma de vena periférica que los hombres. Sin embargo, debe tenerse en cuenta que, dado que los pacientes se incluyeron en el estudio de forma consecutiva, las comparaciones en cuanto a los niveles plasmáticos de relaxina-2 se realizaron entre 9 mujeres y 59 hombres. En nuestro estudio hemos encontrado que los niveles plasmáticos de relaxina-2 en AI y vena periférica están significativamente aumentados en pacientes con FA que están en ritmo sinusal en el momento del procedimiento (lo que implica una enfermedad menos grave). De esta forma, podríamos hipotetizar que el aumento de los niveles plasmáticos de LA y relaxina-2 periférica en pacientes con FA que presentaban ritmo sinusal en el estudio, podría estar ejerciendo los múltiples efectos beneficiosos cardioprotectores durante eventos patológicos (FA en este caso) que se han descrito para esta molécula, y que incluyen la supresión de la arritmia y la inflamación, la reversión de la fibrosis o la mejora del estrés oxidativo19,20. Hasta el momento, solo dos trabajos han reportado niveles circulatorios de relaxina-2 en pacientes con FA8,9, pero en ninguno de ellos se ha descrito una asociación entre los niveles de relaxina-2 y el ritmo de los pacientes, salvo el trabajo de Zhou et al. . (2016), que incluyeron pacientes control con ritmo sinusal (sin FA, y por ello no comparable con nuestro estudio) en los que los niveles séricos de relaxina-2 eran significativamente más bajos que en pacientes con FA tanto paroxística como persistente8. El aumento de la expresión de ARNm de IL-6 en leucocitos de sangre de LA y el aumento de los niveles plasmáticos de LA H2O2 en pacientes con FA con ritmo de FA podrían estar relacionados con el daño tisular en estos pacientes con una FA más grave25.

Los hallazgos de investigaciones recientes en modelos animales y ensayos clínicos en humanos han resaltado un papel fundamental de la fibrosis, la inflamación y el estrés oxidativo en el riesgo, el inicio, la progresión y el mantenimiento de la FA14,26,27. Por lo tanto, decidimos estudiar la asociación entre los niveles plasmáticos de relaxina-2 en AI y vena periférica de pacientes con FA con moléculas implicadas en fibrosis, inflamación y estrés oxidativo, lo que podría ser útil para la predicción del riesgo de FA y podría ayudar a identificar posibles vías o marcadores implicados en la aparición de la FA, así como para evaluar estrategias terapéuticas prometedoras para la FA, como el tratamiento con relaxina-2 o serelaxina.

Con respecto a la fibrosis, un insulto patológico común en la FA, nuestros hallazgos mostraron que los pacientes con FA con altos niveles de relaxina-2 en el plasma de la vena periférica también tenían altos niveles de Gal-3 en el plasma de la vena periférica. Gal-3 es una lectina fijadora de beta-galactósido que presenta una expresión aumentada en los tejidos fibróticos y actúa como regulador de la fibrosis y la inflamación, siendo considerado un biomarcador emergente de enfermedades cardiovasculares28,29, especialmente del remodelado cardíaco que tiene lugar en la FA pacientes30. De hecho, algunos autores han sugerido que un aumento en los niveles circulatorios de Gal-3 podría estar asociado con un mayor riesgo de desarrollar FA31, aunque otros no respaldan el papel de Gal-3 en la predicción del riesgo de FA después de tener en cuenta otros factores clínicos tradicionales. Factores de riesgo de FA32. A pesar de que los niveles circulatorios de Gal-3 aumentan en pacientes con FA sometidos a ablación con catéter de radiofrecuencia, Gal-3 no es útil para predecir el resultado del ritmo, porque ese aumento podría deberse a comorbilidades cardiometabólicas y no al ritmo cardíaco, por lo que se necesitan más estudios para establecer si Gal-3 podría predecir la recurrencia33. Relaxina-2 posee un fuerte efecto antifibrótico en el sistema cardiovascular1,2,6, y de manera similar a nuestros resultados con respecto a Gal-3, se ha determinado que los pacientes con FA con niveles séricos altos de relaxina-2 también mostraron un aumento en los niveles séricos de varios biomarcadores fibróticos e inflamatorios como TGF-β, PICP y TNF-α8. En conjunto, toda esta evidencia sugiere que la relaxina-2 está estrechamente asociada con los mecanismos de fibrosis y con diferentes biomarcadores fibróticos, lo que sugiere que la síntesis endógena de relaxina-2 podría aumentar como un mecanismo compensatorio en respuesta a un estímulo fibrótico en el tejido cardíaco. Además, nuestros resultados demuestran por primera vez que el tratamiento con relaxina-2 inhibe la migración de fibroblastos cardíacos auriculares humanos normales (lo cual está en concordancia con hallazgos previos en fibroblastos cardíacos de rata34) y, además, reduce la expresión de proteína y ARNm de TGF-β1 en nuestras células, de acuerdo con el papel propuesto para la relaxina-2 en la interrupción del eje profibrótico TGF-β1/IL-1β35, lo que sustenta un posible uso terapéutico de la relaxina-2 para la inhibición de la fibrosis cardíaca, que podría ser adecuado para el manejo de la FA .

La inflamación podría estimular el desarrollo de la FA, pero también podría inducirse durante la existencia de la FA; y por lo tanto, la lesión de los cardiomiocitos auriculares durante la FA puede causar una respuesta inflamatoria y remodelación27. De hecho, trabajos previos han descrito un aumento en los niveles de citocinas proinflamatorias en pacientes con FA en comparación con voluntarios sanos, escenario que podría estar relacionado con la fibrosis auricular y con el daño y apoptosis de los cardiomiocitos36. Además, la presencia de inflamación en el corazón o la circulación sistémica puede predecir la aparición y recurrencia de la FA27. En el presente estudio, encontramos que los pacientes con FA con altos niveles circulatorios de relaxina-2 mostraron una disminución en la expresión génica de dos marcadores inflamatorios (DEFA3 e IL-6) en leucocitos del plasma LA. Poco se sabe sobre el papel en la FA de DEFA3, una proteína secretada por la grasa epicárdica que está involucrada en la inflamación, y cuyos niveles plasmáticos se han encontrado disminuidos en pacientes con FA posquirúrgica37, considerándose como un probable riesgo inflamatorio y predictor pronóstico de enfermedad cardiovascular37,38,39. La IL-6 es una citocina capaz de inducir la adhesión y agregación de células inflamatorias, junto con la activación de proteínas reactivas de fase aguda (como el fibrinógeno o la proteína C reactiva), provocando inflamación del músculo auricular, hipertrofia del ventrículo izquierdo, rigidez del ventrículo, aumento de la contenido de colágeno, fibrosis auricular y aparición de FA27,40. Además, los pacientes con FA presentan niveles plasmáticos elevados de IL-6, que se supone que participa en el desarrollo y mantenimiento de la FA27. De hecho, los niveles plasmáticos elevados de IL-6 se correlacionan directamente con el tamaño de la AI, la duración de la FA y la recurrencia de la FA después de la ablación con catéter de radiofrecuencia41,42,43. El papel antiinflamatorio ampliamente conocido de la relaxina-2 en el tejido cardíaco (incluida la disminución de citoquinas proinflamatorias como IL-6, IL-1β, TNF-α y proteína quimioatrayente de monocitos-1 (MCP-1), o la reducción en la infiltración de macrófagos y neutrófilos)3,44,45,46, además de nuestros hallazgos presentados aquí, puede reforzar la hipótesis de un papel para la relaxina-2 como modulador de la inflamación y remodelación auricular.

El estrés oxidativo es otro mecanismo importante que contribuye a la aparición de la FA a través, por ejemplo, del aumento de O2– a través de la acción de la NAD(P)H oxidasa en las aurículas humanas14,47,48. La aparición de estrés oxidativo podría alterar las características electrofisiológicas cardíacas, regular el manejo del calcio en los cardiomiocitos, estimular la inflamación, aumentar la proliferación de fibroblastos en las aurículas y contribuir a la fibrosis auricular y al progreso de la FA47,49,50. Asimismo, otro factor relacionado con el desarrollo de la FA es el aumento de los niveles de H2O2, que están en estrecha relación con el remodelado estructural y con la fibrosis auricular, y que podrían modificar las características electrofisiológicas de las venas pulmonares y la AI, así como la homeostasis del calcio auricular, provocando la FA ocurrencia51,52,53. Nuestros hallazgos han demostrado que los hombres con FA y con niveles plasmáticos más altos de relaxina-2 en vena periférica presentaron una reducción en los niveles circulatorios de H2O2 en vena periférica. Para notar, varios estudios preclínicos y clínicos previos han descrito que el tratamiento con relaxina-2 podría inducir un efecto antioxidante (disminución de O2–, especies reactivas de oxígeno (ROS), lactato deshidrogenasa (LDH), malondialdehído (MDA) y ácido úrico, mientras que aumenta la catalasa , glutatión peroxidasa (GPX) y glutatión (GSH)) y podría reducir los niveles de H2O2 en el sistema cardiovascular54,55,56,57. Toda esa evidencia, además de nuestros hallazgos actuales, podría conducir a la hipótesis de que la relaxina-2 endógena podría modular los niveles plasmáticos de H2O2 en respuesta a la FA; aspecto de relevancia para el potencial uso de esta hormona como estrategia terapéutica en el manejo de la FA58.

Los resultados de este trabajo pueden contribuir a aclarar el papel de la relaxina-2 en la fisiopatología de la FA, proporcionando nuevos conocimientos sobre las funciones de esta hormona en el remodelado estructural auricular. Asimismo, nuestros hallazgos infieren que los niveles plasmáticos de relaxina-2 en pacientes con FA podrían ser útiles como biomarcador en el contexto de esta patología.

Todos los ensayos clínicos con relaxina-2 en pacientes con enfermedades fibróticas han dado hasta ahora resultados no concluyentes, pero un metaanálisis reciente de los efectos de la relaxina-2 en la ICA ha llegado a la conclusión de que la administración de relaxina-2 reduce significativamente el riesgo de empeoramiento de síntomas y mejora los marcadores de función renal59, lo que apunta a la necesidad de futuras investigaciones clínicas adicionales diseñadas con precisión. Los resultados de nuestro trabajo, que demuestran los efectos antifibróticos de la relaxina-2, especialmente la capacidad de interferir con la señalización de TGF-β1 y de reducir el reclutamiento y la activación de fibroblastos, pueden ayudar a proporcionar datos útiles para investigar algunas oportunidades futuras para el uso terapéutico de la relaxina. -2 en enfermedades fibróticas, como IC y/o FA.

La principal limitación de este estudio es el diferente número de hombres y mujeres que participaron en el estudio, lo que se debe principalmente a que los pacientes fueron reclutados consecutivamente desde octubre de 2016 hasta octubre de 2017. La fibrosis auricular de los pacientes no se cuantificó mediante el análisis de técnicas de imagen. , que es más preciso que la determinación de Gal-3 y/o el mapeo de voltaje. El reclutamiento de pacientes se realizó en un único centro. Dado que necesitábamos plasma LA para probar los niveles de relaxina-2, el reclutamiento de los pacientes se realizó antes de la ablación con catéter de radiofrecuencia de la vena pulmonar, lo que implica que no tenemos sujetos sanos de control para comparar. Las muestras de sangre de los pacientes solo se recolectaron antes de la ablación con catéter de radiofrecuencia de la vena pulmonar, y los estudios futuros deben incluir muestras de sangre y análisis de imágenes durante el seguimiento de los pacientes. El modelo in vitro con células NHCF-A constituye una aproximación preclínica para el estudio de los mecanismos fisiopatológicos de la FA, pero son necesarios más estudios adicionales con, por ejemplo, modelos animales, para explicar los mecanismos antifibróticos de la relaxina-2 a partir de un perspectiva clínica.

Todos los reactivos se obtuvieron de Sigma-Aldrich (MO, EE. UU.), a menos que se indique lo contrario. La relaxina lútea humana recombinante-2 (RLX2) fue proporcionada amablemente por el Dr. Mario Bigazzi y el Dr. Daniele Bani (Fundación para la Investigación de la Relaxina en Enfermedades Cardiovasculares y otras Enfermedades del Instituto Prosperius y Departamento de Medicina Experimental y Clínica de la Universidad de Florencia). , ÉL).

La población de estudio estuvo compuesta por 68 pacientes caucásicos consecutivos (59 hombres y 9 mujeres) con FA paroxística, persistente o persistente de larga evolución, que fueron sometidos a ablación con catéter de radiofrecuencia de venas pulmonares en el Área Cardiovascular del Hospital Clínico Universitario de Santiago de Chile. Compostela. Los criterios de exclusión fueron edad menor de 18 años, embarazo y cualquier condición infecciosa latente. Ninguno de los 68 pacientes con FA incluidos en el estudio presentaba antecedentes de ablación previa de FA.

Durante el procedimiento de ablación con catéter (después de 8 h de ayuno), inmediatamente después de la punción transeptal y previo a la administración de heparina, se obtuvieron muestras de sangre de la aurícula izquierda (AI) a través de la vaina transeptal y, simultáneamente, se obtuvieron muestras de sangre de venas periféricas de la vena femoral derecha. Las muestras de sangre de LA y venas periféricas se recogieron en tubos con EDTA y se centrifugaron con o sin aprotinina (PanReac AppliChem ITW Reagents, NL) a 2000 g durante 15 min y 4 °C. La cardioversión eléctrica se realizó después de la extracción de sangre (para evitar cualquier cambio que pudiera suponer una modificación de los biomarcadores del estudio) y antes de la reconstrucción y ablación de la aurícula izquierda. Nuestro flujo de trabajo fue (1) obtener los accesos femorales; (2) punción transeptal; (3) una vez en la aurícula izquierda, extraer la sangre de la vaina transeptal y simultáneamente de la vena femoral derecha; (4) realizar la cardioversión eléctrica; (5) una vez en ritmo sinusal, se realiza el mapa de la aurícula izquierda y se apunta a la vena pulmonar.

Los pacientes se sometieron a ablación con catéter de radiofrecuencia punto por punto (SmartTouch, Biosense Inc., EE. UU.). El punto final del procedimiento fue el aislamiento de la vena pulmonar ipsilateral (PVI).

La evaluación del área de superficie de LA y la fibrosis de LA se basó en un mapa de voltaje bipolar, que se creó simultáneamente con la reconstrucción de la superficie de LA, guiada por un sistema de mapeo electroanatómico tridimensional (CARTO3, Biosense Webster, EE. UU.) usando un catéter de mapeo multipolar (PentaRay, Biosense Webster, Estados Unidos). Se estableció adecuada calidad de los puntos de voltaje adquiridos según módulo CONFIDENSE tras compensación respiratoria. Este es un software de mapeo continuo con adquisición de datos automatizada cuando se cumplen los criterios establecidos, entre ellos: (1) indicación de proximidad del tejido (filtrado basado en la proximidad de puntos adquiridos con el PentaRay); (2) anotación de frente de onda (un algoritmo de anotación automatizado que incorpora señales unipolares y bipolares); (3) consistencia del mapa (el sistema identifica los puntos periféricos cuando se cumplen ciertos criterios; (4) filtro de estabilidad de la posición (garantiza que la posición del catéter sea consistente con la ubicación anterior, establecida en < 5 mm); (5) estabilidad de la duración del ciclo (mantiene los datos recopilados dentro de un rango de longitudes de ciclo predefinido, establecido en un 10% sobre el promedio), se solicitó un número mínimo de puntos (> 1000) y el umbral de llenado de densidad se mantuvo constante en ≤ 5 mm.

Los mapas anatómicos de LA y todos los puntos adquiridos fueron meticulosamente revisados ​​manualmente y anotados fuera de línea. Se utilizaron tres cortes diferentes para las zonas de baja tensión (LVZ), según el ritmo subyacente. En el mapeo de ritmo sinusal, el corte de LVZ fue < 0,5 mV y el rango de TrZ estuvo entre 0,5 y 1 mV. Si el mapeo era en FA, el corte de ZVI era < 0,24 mV y en aleteo auricular (AFL) < 0,3 mV. La zona de bajo voltaje se identificó como un área de al menos 1 cm2 en el área que contiene ≥ 3 puntos vecinos con ≤ 10 mm de distancia60. El área de la LVZ y la zona de transición (TrZ) se midieron rodeando manualmente el área con una herramienta de medición y se expresaron en cm2. La carga se calculó como el porcentaje del área superficial total de la aurícula izquierda excluyendo los orificios de la vena pulmonar (PV) y el área de la válvula mitral. Todos los pacientes se sometieron a PVI circunferencial de área amplia ipsilateral con el uso de un catéter de ablación de punta irrigada con detección de fuerza de contacto (FC) (Smart-Touch®, Biosense Webster, Diamond Bar, EE. UU.) y un módulo de anotación de ablación automática (Visi-Tag®, Diamond Bar, Estados Unidos).

Los niveles plasmáticos de relaxina-2 se midieron utilizando un kit comercial de ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) (Cat# K9210, Immunodiagnostik AG, DE), según las instrucciones del fabricante. Los resultados son el promedio de mediciones duplicadas. El límite de detección de este ensayo es de 0,50 pg/mL. Los coeficientes de variación intraensayo fueron 4,7 % para 34,4 pg/mL (n = 20), 2,5 % para 99,6 pg/mL (n = 20) y 2,3 % para 206,0 pg/mL (n = 20). Los coeficientes de variación entre ensayos fueron 10,2 % para 40,8 pg/mL (n = 42), 6,3 % para 112,0 pg/mL (n = 42) y 5,5 % para 220 pg/mL (n = 42). Si los niveles de relaxina-2 estaban por debajo del límite de detección, se fijaron en 0,4 pg/mL para el análisis de datos, como se informó anteriormente17.

Los niveles plasmáticos de galectina-3 se determinaron usando un kit ELISA comercial (Cat# BMS279/4TEN, eBioscience, Thermo Fisher Scientific, AT), de acuerdo con los protocolos de los fabricantes. Los resultados son el promedio de mediciones duplicadas. El límite de detección de este ensayo es de 0,29 ng/mL. Los coeficientes de variación intraensayo e interensayo fueron 7,5% y 5,4%, respectivamente.

Después de la centrifugación, se recogieron leucocitos de sangre auricular de la capa blanca de glóbulos, que se transfirieron a otro tubo para lisar eritrocitos con NH4Cl 155 mM. Posteriormente, las células fueron precipitadas y lavadas con solución salina y centrifugadas durante 5 min. Al final, las células se lisaron con RLT (Qiagen, GE), el ARN se aisló con el kit Allprep RNA/protein y el ADN complementario (cDNA) se sintetizó con la actividad Maxima Reverse Transcriptase (Thermo Scientific, EE. UU.). Después de la retrotranscripción, se usaron 2 μl de ADNc para la amplificación de interleucina-6 (IL-6) y alfa-defensina 3 (DEFA3) usando FastStart SYBR Green Master (Hoffmann-La Roche, CH). Los cebadores IL-6 (Número de acceso: NM_001371096.1, F-TGAGGTGCCCATGCTACATTT, R-GTGGCTGCAGGACATGACAA)61, DEFA3 (Número de acceso: NM_005217, F-TCCCAGAAGTGGTTGTTTCC, R-CAGAATGCCCAGAGTCTTCC)62 y ACTB (β-actina) (Número de acceso : NM_001101.5, F-TTCTGACCCATGCCCACCAT; R-ATGGATGATGATATCGCCGCGCTC)63 se amplificaron a 40 ciclos (95 °C durante 30 s, 60 °C durante 60 s) en una máquina de PCR en tiempo real Stratagene Mx3005P (Agilent Technologies, EE. UU.). Los valores de umbral de ciclo (Ct) de IL-6 y DEFA3 se normalizaron mediante los valores de Ct de β-actina (ΔCt) del grupo de control y RLX2 (2-ΔCt; en lo sucesivo denominados niveles de expresión génica).

Los niveles plasmáticos de H2O2 en LA y venas periféricas se determinaron mediante un ensayo enzimático que utiliza la reacción cromogénica Fe3+ − xylenol orange con un rango de detección de 0,2–30 μM (Merck, DEU).

Se obtuvieron fibroblastos cardíacos auriculares humanos normales (NHCF-A) de Lonza (Lonza Biologics, CH, RRID:SCR_000377) y se descongelaron, sembraron y mantuvieron siguiendo el protocolo de fabricación. Las células se incubaron en una atmósfera humidificada con 5 % de CO2 a 37 ℃, los medios se renovaron cada 2 o 3 días y las células se pasaron cuando alcanzaron aproximadamente el 90 % de confluencia con la solución de tripsina-EDTA; Se utilizaron matraces de 25 cm2 para el mantenimiento del cultivo celular primario. Las células NHCF-A se sembraron en placas de 6 o 24 pocillos múltiples para tratamientos celulares con RLX2. Las células de cultivo primario NHCF-A mostraron expresión de ARNm del dominio extra A de fibronectina (FN-EDA) (2,73 ± 0,37 en control; 3,20 ± 0,35 en RLX2 a 1 ng/mL, n = 3) y cadena pesada 10 de miosina (MYH10) ( 2,96 × 10–2 ± 6,63 × 10–1 en control; 2,45 × 10–2 ± 4,22 × 10–1 en RLX2 a 1 ng/mL, n = 3). Teniendo en cuenta estos datos, no podemos excluir una transición parcial del fenotipo de fibroblastos cardíacos a miofibroblastos en nuestro sistema de cultivo celular. NHCF-A se aisló de tejido cardíaco adulto normal.

Para realizar el ensayo de cicatrización de heridas, se sembró NHCF-A a aproximadamente 1 × 105 por pocillo en placas de 24 pocillos múltiples. Las células se privaron de suero durante 8 h antes del comienzo del experimento. Usando una punta de pipeta de plástico, se creó un campo de herida con un espacio definido de 1 mm en cada pozo, y luego las células se trataron con RLX2 a 1 o 10 ng/mL, o vehículo (solución salina tamponada con fosfato (PBS)) (n = 6 réplicas biológicas × 4 réplicas técnicas), como se describió previamente35,54,64, sin suero fetal bovino (FBS) para inhibir la proliferación celular y permitir la migración celular. Los campos aleatorios se fotografiaron con un microscopio invertido automatizado/motorizado Leica DMI6000B (Leica Microsystems, DE) durante el procedimiento de evolución temporal. Las áreas de la herida que trazan el área libre de células se cuantificaron en diferentes tiempos (0, 4, 8, 12, 16 y 24 h) con el software Fiji ImageJ. Las áreas de la herida se relativizaron con respecto al área del tiempo inicial (t0). Los resultados se expresan como porcentaje de la migración:

siendo A0 el área de herida medida a las 0 hy Ax el área de herida medida en los diferentes tiempos (4, 8, 12, 16 y 24 h). El experimento se realizó en NHCF-A entre 4 y 6 pases (n = 6 réplicas biológicas).

NHCF-A se sembró en placas de 24 pocillos múltiples en la misma confluencia que para los ensayos de cicatrización de heridas. Después de la privación de suero durante 8 h, las células se trataron con RLX2 a una dosis de 1 ng/mL35,54,64 o con vehículo (PBS) (condición = 3 réplicas biológicas × 4 réplicas técnicas) durante 24 h. Al final del proceso, las células se lisaron para la determinación de la cadena alfa 2 del colágeno tipo I (COL1A2), el receptor del dominio de discoidina tirosina quinasa 2 (DDR2), el receptor alfa del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFRα), la periostina (POSTN), la alfa niveles de actina de músculo liso (αSMA), factor de crecimiento transformante β1 (TGF-β1), vimentina (VIM) y gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH). Además, se determinó la expresión de ARNm del dominio extra A de fibronectina (FN-EDA) y la cadena pesada 10 de miosina (MYH10) para fenotipar las células NHCF-A. Así, el ARN se aisló con el High Pure RNA Isolation Kit (Hoffmann-La Roche, CH), siguiendo el protocolo del fabricante, y el cDNA se sintetizó con el Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit (Thermo Fisher Scientific, EE. UU.). Se realizó PCR en tiempo real con los primers COL1A2, DDR2, PDGFRα, POSTN, αSMA, TGF-β1, VIM, FN-EDA y MYH10 para cuantificar los niveles de expresión de mRNA con respecto a los niveles de GAPDH como se describió previamente (COL1A2 (Accession número de registro: NM_000089.3)65: F‐TCGCACATGCCGTGACTTG; R‐GATAGCATCCATAGTGCATCCTTG, DDR2 (Número de acceso: NM_001014796.3)66: F‐AACGAGAGTGCCACCAATGGCT; R‐ACTCACTGGCTTCGAGCGGAA, PDGFRα (Número de acceso: NM_001347830.2 )67: F‐GACTTTCGCCAAAGTGGAGGAG; R‐AGCCACCGTGAGTCAGAACGC, POSTN (Número de acceso: NM_001135935.2)67: F‐CGTTGCTCTCCAAACCTCTA; R‐TGCCCAGCAGTTTTGCCCAT, αSMA (Número de acceso: NM_001613.4)68: F‐CCGACCGAATGCAGAAGGA; R‐ACAGAGTATTTGCGCTCCGAA, TGF-β1 (Número de acceso: NM_000660 .7)69: F‐TACCTGAACCCGTGTTGCTCTC; R-GTTGCTGAGGTATCGCCAGGAA, VIM (Número de acceso: NM_003380.5)70: F‐AGGCAAAGCAGGAGTCCCACTGA; R-ATCTGGCGTTCCAGGGACTCAT, FN-EDA (Número de acceso: NM_002026.4)71: F-CCAGTCCACAGCTATT CCTG;R -ACAACCACGGATGAGCTG, MYH10 (Número de acceso: NM_001256095.2)72: F-TCCCGCTGGAGTTTACGC; R-GCAGGAAGCCAAGGAACG y GAPDH (Número de acceso: NM_001357943.2)73: F‐CATGTTCGTCATGGGGTGAACCA; R‐AGTGATGGCATGGACTGTGGTCAT).

NHCF-A se sembró en placas de 6 pocillos múltiples y después de la privación de suero durante 8 h, las células se trataron con RLX2 utilizando una dosis de 1 ng/mL o vehículo (PBS) durante 24 h (n = 6 réplicas biológicas)35,54 ,64. Los NHCF-A se lisaron y se sometieron a SDS-PAGE/Western blot como se describió anteriormente74, usando anticuerpos primarios contra el factor de crecimiento transformante-β1 (TGF-β1) (1:1000, Cat# ab179695, abcam, GB) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Empleamos IgG-HRP anti-conejo de ratón (1:1000, Cat# sc-2357, Santa Cruz Biotechnology, Inc., EE. UU.) como anticuerpo secundario. La visualización de las intensidades de las bandas de proteínas se determinó mediante quimioluminiscencia con el sustrato Clarity Western ECL (Bio-Rad Laboratories, Inc., EE. UU.) y un sistema de imágenes ChemiDoc MP (Bio-Rad Laboratories, Inc., EE. UU.) y se normalizó con gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH) (1:1000, Cat# G9545, Sigma-Aldrich, EE. UU.) cuando se cuantifica.

Para el análisis descriptivo de los datos clínicos, las variables categóricas se expresan como recuentos y proporciones, mientras que las variables continuas se expresan como mediana ± rango intercuartílico (RIC) y los valores n exactos para cada variable se representan en tablas. Los pacientes se dividieron de acuerdo con el valor mediano de la distribución de relaxina-2 en la AI y la vena periférica, y los subgrupos se compararon con respecto a los parámetros clínicos y analíticos, así como las mediciones de biomarcadores. La comparación entre grupos se realizó aplicando la prueba exacta de Fisher para variables categóricas y la prueba U de Mann-Whitney para variables continuas sin distribución normal. Las variables con distribución normal se expresaron como media ± desviación estándar (DE) y las variables sin distribución normal como mediana ± RIC. Las pruebas de correlación entre los biomarcadores y los niveles plasmáticos de relaxina-2 se realizaron con el análisis de correlación bivariada de Spearman. Se realizaron modelos de regresión logística para comprobar qué variables se podían añadir al conjunto de factores de riesgo de FA (edad, índice de masa corporal (IMC) e hipertensión arterial (HTA)), con el objetivo de aumentar significativamente la capacidad predictiva de esa conjunto de covariables. Para el análisis experimental in vitro, los datos se expresan como media ± SD o mediana ± IQR de al menos tres mediciones individuales por grupo. La prueba de normalidad utilizada fue la de Kolmogorov-Smirnov. Las comparaciones entre los grupos experimentales y los controles se realizaron con la prueba t pareada o la prueba de rango con signo de Wilcoxon. El análisis estadístico se realizó con GraphPad Prism 5 (GraphPad Software Inc., EE. UU.) e IBM SPSS Statistics 20.0 (IBM, EE. UU.). El análisis de las mediciones fue realizado por un científico diferente para evitar el sesgo del observador. Se consideró significativo un valor de p < 0,05.

El protocolo del estudio sigue las pautas éticas de la Declaración de Helsinki y la guía del Consejo de Investigaciones Médicas y fue revisado y aprobado por el Comité Ético de Investigación Clínica de Galicia (Aprobación número 2014/356). Todos los pacientes que participaron en el estudio firmaron el consentimiento informado por escrito.

Los conjuntos de datos utilizados y/o analizados durante el presente estudio están disponibles del autor correspondiente previa solicitud razonable.

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Nos gustaría expresar nuestro agradecimiento al Dr. Mario Bigazzi y al Dr. Daniele Bani (Fundación para la Investigación de Relaxina en Enfermedades Cardiovasculares y otras Enfermedades en el Instituto Prosperius y Departamento de Medicina Experimental y Clínica en la Universidad de Florencia, Florencia, IT) por su amabilidad proporcionándonos la relaxina luteínica humana recombinante-2 (RLX2) empleada en este trabajo.

Este trabajo fue financiado por la Sociedad Española de Cardiología y el Instituto Nacional de Salud "Fondo de Investigaciones Sanitarias. Instituto de Salud Carlos III (ISCIII)" Madrid, España [PI15/00681, PI17/00409, PI18/00821, PI19/01330 , y CIBER de Enfermedades Cardiovasculares (CIBERCV)]; Fondo Europeo de Desarrollo Regional (FEDER) y Programa Marco de la Unión Europea MSCA-RISE-H2020 [Número de proyecto 734899]. Alana Aragón-Herrera fue financiada por becas de investigación predoctoral de GAIN-Xunta de Galicia, Programa FPU del Ministerio de Ciencia, Innovación y Universidades de España (España) y Sociedad Española de Cardiología. Marinela Couselo-Seijas fue financiada por una beca de investigación predoctoral de IDIS. Laura Anido-Varela fue financiada por una beca de investigación predoctoral del Programa PFIS español del Instituto de Salud Carlos III (ISCIII) (España). Sandra Moraña-Fernández fue financiada por una beca de investigación predoctoral de GAIN-Xunta de Galicia.

Los siguientes autores contribuyeron por igual: Alana Aragon-Herrera, Marinela Couselo-Seijas, Sonia Eiras y Francisca Lake.

Unidad de Cardiología Celular y Molecular y Departamento de Cardiología, Instituto de Investigaciones Biomédicas de Santiago de Compostela (IDIS-SERGAS), Travesía da Choupana s/n, 15706, Santiago de Compostela, España

Alana Aragón-Herrera, Sandra Feijóo-Bandín, Laura Anido-Varela, Sandra Moraña-Fernández, José Ramón González-Juanatey & Francisca Lago

CIBERCV, Institute of Health Carlos III, C/ Monforte de Lemos 3-5, Pabellón 11, Planta 0, 28029, Madrid, Spain

Alana Aragón-Herrera, Sandra Feijóo-Bandín, Estefanía Tarazón, Esther Roselló-Lletí, Manuel Portolés, José Luis Martínez-Sande, Javier García-Seara, Ezequiel Álvarez, José Ramón González-Juanatey, Moisés Rodríguez-Mañero, Sonia Eiras & Francisca Lago

Grupo de Cardiología Traslacional, Instituto de Investigaciones Biomédicas de Santiago de Compostela (IDIS-SERGAS), Travesía da Choupana s/n, 15706, Santiago de Compostela, España

Marinela Couselo-Seijas & Sonia Eiras

Grupo de Cardiología, Centro de Investigación en Medicina Molecular y Enfermedades Crónicas (CIMUS), Universidad de Santiago de Compostela e Instituto de Investigación Sanitaria, Hospital Clínico Universitario de Santiago de Compostela, 15706, Santiago de Compostela, España

Sandra Moraña-Fernández

Cardiocirculatory Unit, Health Institute La Fe University Hospital (IIS La Fe), Avda. de Fernando Abril Martorell 106, 46026, Valencia, Spain

Estefanía Tarazón, Esther Roselló-Lletí & Manuel Portolés

Unidad de Arritmias, Hospital Clínico Universitario de Santiago de Compostela, Travesía da Choupana s/n, 15706, Santiago de Compostela, España

José Luis Martínez-Sande, Javier García-Seara & Moisés Rodríguez-Mañero

Instituto de Investigaciones Biomédicas de Santiago de Compostela (IDIS-SERGAS), Travesía da Choupana s/n, 15706, Santiago de Compostela, España

Ezequiel Álvarez

Departamento de Farmacología, Farmacia y Tecnología Farmacéutica, Universidad de Santiago de Compostela, 15782, Santiago de Compostela, España

Ezequiel Álvarez

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AAH y MCS realizaron el desarrollo de la metodología, recolectaron, analizaron e interpretaron los datos, escribieron el primer borrador del documento. SFB, LAV, SMF y EA realizaron el desarrollo de la metodología y la interpretación de los datos. ET, ERL y MP brindaron apoyo técnico y material. JLMS, JGS y JRGJ reclutaron pacientes, proporcionaron adquisición, análisis e interpretación de datos y análisis estadístico. MMR, SE y FL realizaron el concepto y el diseño del estudio, supervisaron la investigación, realizaron el desarrollo de la redacción, revisión y revisión del artículo. Todos los autores revisaron el manuscrito.

Correspondencia a Moisés Rodríguez-Mañero.

Los autores declaran no tener conflictos de intereses.

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Reimpresiones y permisos

Aragon-Herrera , A. , Couselo-Seijas , M. , Feijoo-Bandin , S. et al. Los niveles plasmáticos de relaxina-2 en la fibrilación auricular están relacionados con marcadores de inflamación y estrés oxidativo. Informe científico 12, 22287 (2022). https://doi.org/10.1038/s41598-022-26836-1

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Recibido: 02 Marzo 2022

Aceptado: 21 de diciembre de 2022

Publicado: 24 diciembre 2022

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-022-26836-1

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